miR-7低表达导致非小细胞肺癌细胞吉非替尼耐药的作用机制

更新时间:2023-05-28

【摘要】目的非小细胞肺癌（NSCLC）患者吉非替尼耐药的机制仍然是目前研究的热点。文中旨在探讨吉非替尼获得性耐药肺癌细胞与非耐药细胞相比,MicroRNA（miRNA）的表达差异及调控MicroRNA表达后细胞的生长特性。方法以NSCLC细胞A549、H1299为研究对象,构建吉非替尼耐药细胞,应用CCK-8法检测吉非替尼对细胞活性的影响,实时荧光定量PCR检测耐药、非耐药细胞中MicroRNA的表达量,微阵列检测细胞内MicroRNA表达谱,转染质粒上调mir-7的表达,Western blot检测细胞内表皮生长因子受体（EGFR）蛋白表达。结果吉非替尼耐药A549、H1299细胞的IC50值是非耐药细胞的3倍。与A549、H1299非耐药细胞比较,其耐药细胞生长较为缓慢。MiRNA阵列分析中检测到43种miRNA的表达谱发生了显著变化,其中有25种上调的miRNA和18种下调的miRNA,miR-7在耐药细胞中显著下调。qPCR定量检测结果表明mir-21、mir-124c、mir-181明显上调,mir-7、mir-146a、mir-145-p明显下调,其中mir-7变化最显著（P50由7.23μg/mL降低至2.46μg/mL,A549耐药细胞IC50由6.85μg/mL降低至2.23μg/mL（P<0.05）。结论 miR-7的表达能负向调控EGFR的表达,miR-7的下调是导致NSCLC细胞吉非替尼耐药的机制之一。

【关键词】 非小细胞肺癌 吉非替尼 MicroRNA表达谱 miR-7 表皮生长因子受体 耐药

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